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    液相色譜儀使用及工作原理

    時間:2022-08-25 點擊次數:934
      工作原理:流動相通過輸液泵流經進樣閥,與樣品溶液混合,流經色譜柱,在色譜柱中進行吸附、分離,最后每一組分分別經過檢測器轉變為電訊號,在色譜工作站上出現相應的樣品峰。
      液相色譜的使用:首先對樣品進行預處理,然后進樣,進樣完畢后,清洗進樣口,每次分析結束后,清洗通道,最后關閉儀器。
      擴展資料:液相色譜所用基本概念:保留值、塔板數、塔板高度、分離度、選擇性等與氣相色譜一致。液相色譜所用基本理論:塔板理論與速率方程也與氣相色譜基本一致,但由于在氣相色譜中以液體代替氣相色譜中氣體作為流動相,而液體和氣體的性質不相同。
      此外,液相色譜所用的儀器設備和操作條件也與氣相色譜不同,所以,液相色譜與氣相色譜有一定的差別。
      主要有以下幾力‘面:
     ?、俨僮鳁l件及應用范圍不同
      對于氣相色譜,是加溫操作。僅能分析在操作溫度下能汽化而不分解的物質,對高沸點化合物、非揮發性物質、熱不穩定化合物、離子型化合物及高聚物的分離、分析較為困難,致使其應用受到一定程度的限制,據統計只有大約20%的機物能用氣相色譜分析。
      而液相色譜是常溫操作,不受樣品揮發度和熱穩定性的限制,它非常適合相對分子量較大,難汽化,不易揮發或對熱敏感的物質、離子型化合物和高聚物的分離分析,大約占有機物的70%~80%。
     ?、谝合嗌V能完成難度較高的分離工作
      a.氣相色譜的流動相載氣是色譜惰性的,基本不參與分配平衡過程,與樣品分子無親和作用,樣品分子主要與固定相相互作用。而在液相色譜中流動相液體也與固定相爭奪樣品分子,為提高選擇性增加了一個因素。也可選擇不同比例的兩種或兩種以上的液體做流動相,增加分離的選擇性。
      b.液相色譜固定相類型多,如離子交換色譜和排阻色譜等,作為分析時,選擇余地大;而氣相色譜并不可能。
      c.液相色譜通常在室溫下操作,較低的溫度,一般有利于色譜分離條件的選擇。
     ?、塾捎谝后w的擴散性比氣體的小105倍,因此,溶質在液相中的傳質速率慢,柱外效應就顯得特別重要;而在氣相色譜中,由色譜柱外區域引起的擴張可以忽略不計。
     ?、芤合嗌V中,制備樣品簡單,回收樣品也比較容易,而且回收是定量的,適合于大量制備,但液相色譜尚缺乏通用的檢測器,一起比較復雜,價格昂貴。在實際應用中,這兩種技術是相互補充的。
      綜上所述,液相色譜具有柱效高,選擇性高,靈敏性高,分析速度快,重復性好,應用范圍廣等優點,該法已成為現代分析技術的主要手段之一。目前在化學,化工,醫藥,生化,環保,農業等科學領域獲得廣泛的應用。
      高效液相色譜應用非常廣泛,幾乎遍及定量定性分析的各個領域。
      (1)分離混合物:高效液相色譜法只要求樣品能制成溶液,不受樣品揮發性的限制,流動相可選擇的范圍寬,固定相的種類繁多,因而可以分離熱不穩定和非揮發性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質。
      通過與試樣預處理技術相配合,高效液相色譜法所達到的高分辨率和高靈敏度,可分離并同時測定性質上十分相近的物質,能夠分離復雜混合物中的微量成分。并且隨著固定相的發展,還可在充分保持生化物質活性的條件下完成對其的分離。
      (2)生化分析:由于高效液相色譜法具有高分辨率、高靈敏度、速度快、色譜柱可反復利用,流出組分易收集等優點,因而被廣泛應用到生物化學、食品分析、醫藥研究、環境分析、無機分析等各種領域,并已成為解決生化分析問題有前途的方法。
      (3)儀器聯用:高效液相色譜儀與結構儀器的聯用是一個重要的發展方向。高效液相色譜一質譜聯用技術受到普遍重視,如分析氨基甲酸酯農藥和多核芳烴等:高效液相色譜一紅外光譜聯用也發展很快,如在環境污染分析測定水中的烴類等.使環境污染分析得到新的發展。

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